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解決方案

臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)說明書

點(diǎn)擊次數(shù):16919  日期:2018/7/11 10:18:49

【臺(tái)盼藍(lán)染色液產(chǎn)品概述】
臺(tái)盼藍(lán)(Trypan blue)又稱錐藍(lán)或錐蟲藍(lán)等,分子式為 C34H24N6Na4O14S4,分子量為960.81,CAS Number72-57-1,是一種陰離子型染料。Trypan blue不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜,故活細(xì)胞不著色,即產(chǎn)生所謂的拒染現(xiàn)象,而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增加,可使染料通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),使死細(xì)胞著色呈藍(lán)色,是*常用的檢測(cè)細(xì)胞活率的方法。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失,即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡,這不中性紅作用相反。因此,借助臺(tái)盼藍(lán)染色可以非常簡(jiǎn)便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。臺(tái)盼藍(lán)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中*常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。
Trypan blue stain(0.4%)常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性以及細(xì)胞是否存活;罴(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色,而死細(xì)胞會(huì)被染成淡藍(lán)色。臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬,故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。臺(tái)盼藍(lán)染色后,通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù),就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量,0.4%為*常用的濃度。

Component

SBJ-0245S

SBJ-0245M

Store at

Trypan blue stain(0.4%)

50ml

100ml

4

【臺(tái)盼藍(lán)染色液保存條件】
 4℃,6個(gè)月
【臺(tái)盼藍(lán)染色液使用方法】
1、收集細(xì)胞:
如果收集貼壁細(xì)胞,應(yīng)用胰蛋白酶-EDTA溶液消化細(xì)胞,收集細(xì)胞。如果收集懸浮細(xì)胞,則可以直接收集細(xì)胞。收集好的細(xì)胞在1000~2000g離心1min,棄上清,用1ml PBS重新懸浮細(xì)胞沉淀。
2、臺(tái)盼藍(lán)染色:
吸取100μl細(xì)胞懸液到1.5ml或0.5ml離心管內(nèi),加入100μlTrypan blue stain(0.4%)輕輕混勻,靜置染色3min(染色時(shí)間可適當(dāng)延長(zhǎng),但不宜超過10min)。
3、細(xì)胞計(jì)數(shù):
吸取經(jīng)過染色后的細(xì)胞,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。通常如果要比較精確地進(jìn)行定量,每個(gè)細(xì)胞樣品至少需要數(shù)500個(gè)細(xì)胞,數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。細(xì)胞存活率計(jì)算公式如下:
細(xì)胞存活率=(細(xì)胞總數(shù)-藍(lán)色細(xì)胞數(shù))/細(xì)胞總數(shù)×100%
【注意事項(xiàng)】
1、Trypan blue stain對(duì)人體有輕微毒性,請(qǐng)注意小心防護(hù)。
2、注意凋亡小體偶爾也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。
3、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
 
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