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解決方案

細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)

點(diǎn)擊次數(shù):3205  日期:2015/3/11 16:22:34

細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是一種簡單易行的檢測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的方法,實(shí)驗(yàn)成本低,可以用來檢測(cè)貼壁生長腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。

實(shí)驗(yàn)材料細(xì)胞樣品
試劑、試劑盒無血清培養(yǎng)基PBS
儀器、耗材6孔板marker筆直尺槍頭
抗體Hamster IgG3, λ抗體
Hamster IgG3, λ抗體
Hamster IgG3, λ抗體

實(shí)驗(yàn)步驟
一.準(zhǔn)備:
所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺(tái)內(nèi))

二.流程:
1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2.在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
3.第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜。
4.用PBS洗細(xì)胞3次,去處劃下的細(xì)胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5.放入37度5%CO2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)。按0,6,12,24小時(shí)取樣,拍照。

下面是照片,細(xì)胞NIH3T3
0h



6h


12h

24h

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